??????【摘要】?目的研究阿米卡星(amikacin，AMK)在不同给*时间内对豚鼠耳蜗毛细胞的损伤作用，探讨AMK的耳毒*。方法豚鼠随机分为对照组、AMK3d组、AMK7d组和AMK11d组。采用异硫**四甲基罗丹明标记的鬼笔环肽荧光染*方法，并结合听脑干反应(auditorybrainstemresponse，ABR)测试，观察用*前后耳蜗毛细胞形态及听功能的改变。结果AMK首先损伤耳蜗底回的外毛细胞,并且随着给*时间延长，损伤逐渐向顶回
上海水磨工作室??????【关键词】?阿米卡星;豚鼠;耳蜗;听脑干反应
上海水磨工作室????????ImpairmentEffectofAmikacinonCochlearHairCellsinGuineaPigLIUShuangyue,WANGAimei,XUTao,MUHua(DepartmentofPhysiology,LiaoningMedicalUniversity,Jinzhou121001China)Abstract:ObjectiveToinvestigatetheimpairmenteffectofamikacin(AMK)oncochlearhaircellsinguineapigatdifferentinjectiontime,andtoexploreototoxicityofAMK.MethodsGuineapigswererandomlyassignedtofourgroups:controlgroup,AMK3-daygroup,7-daygroupand11-daygroup.Tetramethylrhodamineisothiocyanate-labeledphalloidinestainingandauditorybrainstemresponse(ABR)measurementwereusedtoevaluatethechangesofhaircellsmorphologyandauditoryfunctionbeforeandafterthedrugtreatment.ResultsOuterhaircells(OHCs)inthebasalturnswerefirstimpairedbyAMK,andtheimpairmentofOHCsdevelopedtotheapicalturnswithtimeprolonging,andthelossofOHCswasincreasedsignificantly.Theinjuryofinnerhaircells(IHCs)inducedbyAMKwaslighterthanOHCs.Changeofauditoryfunctionwasbasicallyconsistentwiththatofmorphology.ConclusionsAMKcandamagethecochlearhaircells,leadingtodeclineinauditoryfunction.
上海水磨工作室Keywords:amikacin;guineapig;cochlea;auditorybrainstemresponse
上海水磨工作室氨基糖苷类抗生素(aminoglycosideantibiotics，AmAn)具有强大的抗革兰氏**杆菌的作用,加之价格低廉,是临床控制感染的常用抗生素[1]。但是AmAn具有严重的耳毒*，可导致耳蜗毛细胞、前庭毛细胞及螺旋神经节细胞的损伤[2-3]。阿米卡星(amikacin,AMK)为半合成的AmAn，亦可对耳蜗毛细胞造成不可逆*的损伤[4]，然而AMK在不同给*时间内对豚鼠耳蜗毛细胞的损伤特点及其与听功能变化的关系，目前尚不清楚。据此，本研究应用异硫**四甲基罗丹明(Tetramethylrhodamineisothiocyanate，TRITC)标记的鬼笔环肽荧光染*方法，并结合听脑干反应(auditorybrainstemresponse，ABR)测试，观察用*前后豚鼠耳蜗毛细胞形态及听功能的改变，以探讨AMK的耳毒*。
1材料与方法
1.1实验动物
上海水磨工作室健康白毛红目豚鼠47只，体重250～300g，雌雄不限，耳廓反射灵敏，无中耳炎，由辽宁医学院实验动物中心提供。实验期间所有豚鼠均在安静状态下饲养并给予常规饮食。
1.2主要试剂和仪器
上海水磨工作室阿米卡星注射液(0.1g/mL，批号090327)由苏州第六制*厂生产，TRITC-鬼笔环肽购自美国Sigma公司，SmartEP&OAE听觉诱发电位-耳声发射记录系统由美国智听公司生产，ZEISSA1荧光显微镜由德国Zeiss公司生产。
上海水磨工作室1.3动物分组与耳毒模型建立?
第2篇：豚鼠耳蜗缺血再灌注损伤后iNOS活*与细胞凋亡关系
目的:探讨椎基底动脉缺血再灌注耳蜗组织损伤方式及可能的损伤机制.方法:健康豚鼠72只,随机分成正常组、假手术组、模型组,每组各8只.用组织化学方法观察缺血再灌注不同时间耳蜗各部位的组织改变;用免疫组织化学法(ABC)检测各组动物耳蜗中诱导型一氧化氮合酶的表达和变化;用原位凋亡法(TUNEL法)观察耳蜗的细胞凋亡情况.结果:缺血再灌注的内外毛细胞变形缺损、血管纹变薄等;诱导型一氧化氮合酶在缺血及再灌注的表达增强;正常组及假手术组没有或仅有个别部位出现细胞凋亡,缺血及再灌注各组内外毛细胞及螺旋神经节部位凋亡细胞明显增多.结论:再灌注期间细胞凋亡数较缺血期间明显增多,其原因为包括一氧化氮在内的多种氧自由基表达增高所致.
上海水磨工作室王丰,WANGFeng(福建中医学院解剖学教研室,福州,350001)?
第3篇：grp75对细胞缺糖损伤的保护作用
为研究grp75的功能，对过表达grp75的CHL细胞进行无糖培养以施加能量代谢应激，运用台盼蓝染*计数、LDH释放测定和流式细胞术等方法评估其损伤程度。结果显示，无糖培养5h，过表达grp75细胞和对照组细胞比较，细胞活率、亚二倍体细胞率均无明显差别；无糖培养10h，过表达grp75细胞的活率高于对照组（P＜0.01），亚二倍体细胞率低于对照组（P＜0.05）；无糖培养至20h，两组细胞活率和亚二倍体细胞比率无显着差别。LDH释放测定结果显示，无糖培养4h，过表达grp75细胞和对照组细胞LDH释放百分比无显着差别；无糖培养7～15h，过表达grp75细胞LDH释放百分比低于对照组（P＜0.05）；无糖培养20h，两组细胞LDH释放百分比无显着差别。这一研究结果表明，过表达grp75的细胞对一定强度的缺糖损害有明显的耐受*（表现为较轻的细胞膜损伤，较轻的DNA断裂和较高的存活率），即细胞内grp75具有对抗缺糖损伤的作用。